制備液相色譜儀是一種由儲液瓶、高壓泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、廢液瓶六部分組成的儀器。

　　輸液泵是HPLC系統(tǒng)中zui重要的部件之一。泵的性能好壞直接影響到整個系統(tǒng)的質(zhì)量和分析結(jié)果的可靠性。輸液泵應(yīng)具備如下性能：

　　1、流量穩(wěn)定，其RSD應(yīng)＜0.5%，這對定性定量的正確性至關(guān)重要；

　　2、流量范圍寬，分析型應(yīng)在0.1~10 ml/min范圍內(nèi)連續(xù)可調(diào)，制備型應(yīng)能達(dá)到100 ml/min；

　　3、輸出壓力高，一般應(yīng)能達(dá)到150~300 kg/cm2；

　　4、液缸容積小；

　　5、密封性能好，耐腐蝕。

 

　　泵的種類很多，按輸液性質(zhì)可分為恒壓泵和恒流泵。恒流泵按結(jié)構(gòu)又可分為螺旋注射泵、柱塞往復(fù)泵和隔膜往復(fù)泵。恒壓泵受柱阻影響，流量不穩(wěn)定；螺旋泵缸體太大，這兩種泵已被淘汰。目前應(yīng)用zui多的是柱塞往復(fù)泵。

　　柱塞往復(fù)泵的液缸容積小，可至0.1ml，因此易于清洗和更換活動相，特別適合于再循環(huán)和梯度洗脫；改變電機轉(zhuǎn)速能方便地調(diào)節(jié)流量，流量不受柱阻影響；泵壓可達(dá)400 kg/cm2。其主要缺點是輸出的脈沖性較大，現(xiàn)多采用雙泵系統(tǒng)來克服。雙泵按連接方式可分為并聯(lián)式和串聯(lián)式，一般說來并聯(lián)泵的流量重現(xiàn)性較好，但出故障的機會較多，價格也較貴。

　　早期使用隔膜和停流進(jìn)樣器，裝在色譜柱進(jìn)口處。現(xiàn)在大都使用六通進(jìn)樣閥或自動進(jìn)樣器。進(jìn)樣裝置要求：密封性好，死體積小，重復(fù)性好，保證中心進(jìn)樣，進(jìn)樣時對色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。HPLC進(jìn)樣方式可分為：隔膜進(jìn)樣、停流進(jìn)樣、閥進(jìn)樣、自動進(jìn)樣。

　　1、隔膜進(jìn)樣：用微量注射器將樣品注進(jìn)專門設(shè)計的與色譜柱相連的進(jìn)樣頭內(nèi)，可把樣品直接送到柱頭填充床的中心，死體積幾乎即是零，可以獲得*的柱效，且價格便宜，操縱方便。但不能在高壓下使用（如10MPa以上）；此外隔膜輕易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應(yīng)，使進(jìn)樣重復(fù)性只能達(dá)到1~2%；加之能耐各種溶劑的橡皮不易找到，常規(guī)分析使用受到限制。

　　2、停流進(jìn)樣：可避免在高壓下進(jìn)樣。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新啟動時往往會出現(xiàn)“鬼峰”；另一缺點是保存時間不準(zhǔn)。在以峰的始末信號控制餾分收集的制備色譜中，效果較好。

　　3、閥進(jìn)樣：一般HPLC分析常用六通進(jìn)樣閥，其關(guān)鍵部件由圓形密封墊和固定底座組成。由于閥接頭和連接管死體積的存在，柱效率低于隔膜進(jìn)樣，但耐高壓，進(jìn)樣量正確，重復(fù)性好（0.5%），操縱方便。

　　4、自動進(jìn)樣：用于大量樣品的常規(guī)分析。